REGULAÇÃO DIFERENCIAL DA F0/F1-ATPASE EM CÉLULAS DE MELANOMA METASTÁTICAS

Resumo

O melanoma é o câncer de pele mais agressivo por apresentar as mais altas incidências de metástase e mortalidade. As bombas de próton dependentes de ATP vêm sendo envolvidas em vários distúrbios metabólicos inerentes à metástase tumoral. Muitos trabalhos demonstram alterações mitocondriais em resposta à demanda metabólica gerada nas células neoplásicas. Através de testes cinéticos evidenciamos uma regulação diferencial da atividade da F0/F1-ATPase em células de melanoma de modelos murinos.Para a execução deste trabalho, foram selecionadas duas linhagens de células de melanoma com diferentes potenciais metastáticos, B16F10 e B16F0. A linhagem não carcinogênica de macrófago transformado J774 foi usada como controle. As células foram cultivadas em meio DMEM, cujo pH é mensurado em escala temporal (24, 48, 72, 96 e 144 h). Tais células, passam por processo de fracionamento celular para isolamento mitocondrial e estudo da atividade hidrolítica Azida-sensível da F0/F1-ATPase.Ensaios preliminares evidenciam uma maior ativação da F0/F1-ATPase nas membranas mitocondriais das células mais metastáticas, em comparação com as menos metastáticas e com as células controle, além de alterações nos valores de Km e Vmax da F0/F1-ATPase. Serão feitos ensaios para testar a eficiência relativa da conversão da energia liberada a partir da fosforilação oxidativa e do processo fermentativo.Em conclusão, as F0/F1-ATPases presentes nas células mais metastáticas parecem sofrer mudanças funcionais que relacionadas com as altas taxas metabólicas inerentes aos processos de carcinogênese e metástase.